二氧化氯片劑使用方法對(duì)其養(yǎng)殖水體中消毒效果之比較

　　文/ 華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 陳昌福、武漢科研時(shí)代生物技術(shù)有限公司 周鑫軍

　　在水產(chǎn)養(yǎng)殖過(guò)程中，采用各種消毒劑實(shí)施所謂的“四消”（苗種、餌料、工具和食場(chǎng)消毒），已經(jīng)是我國(guó)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)者對(duì)水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物疾病防控中采用的常規(guī)措施。

　　二氧化氯（分子式為ClO2）雖然作為“國(guó)標(biāo)漁藥”已經(jīng)被農(nóng)業(yè)農(nóng)村部移出了清單，但是，不少漁藥制售企業(yè)將其作為“非藥品”，迄今為止依然在水產(chǎn)養(yǎng)殖中被大量地使用著。

　　在水產(chǎn)養(yǎng)殖過(guò)程中使用的ClO2制劑大致有3種劑型，即水劑、粉劑和片劑。利用ClO2水劑對(duì)養(yǎng)殖水體進(jìn)行消毒時(shí)，只需要在測(cè)量水體后根據(jù)養(yǎng)殖水體體積，直接潑灑ClO2水劑至養(yǎng)殖水體中達(dá)到一定藥物濃度即可；利用ClO2粉劑對(duì)養(yǎng)殖水體進(jìn)行消毒時(shí)，就需要先用少量池水將ClO2粉劑稀釋、活化15分鐘 左右后，再將其潑灑在養(yǎng)殖水體中達(dá)到一定藥物濃度；而采用ClO2片劑時(shí)，養(yǎng)殖業(yè)者大多是根據(jù)產(chǎn)品說(shuō)明書中規(guī)定的用藥劑量，采用直接將其ClO2片劑拋灑在養(yǎng)殖水體中的用藥方法。

　　為了探討不同劑型的ClO2制劑的使用方法對(duì)養(yǎng)殖水體消毒效果的影響，本試驗(yàn)利用檢測(cè)消毒后養(yǎng)殖池水中可培養(yǎng)細(xì)菌數(shù)量變化的方法，對(duì)ClO2制劑的使用方法與消毒效果的關(guān)系進(jìn)行了初步評(píng)價(jià)。現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下：

　　本試驗(yàn)在武漢市新洲區(qū)汪集鎮(zhèn)魚苗孵化場(chǎng)的養(yǎng)殖池塘中進(jìn)行。該養(yǎng)殖池塘7畝，水深2.5米左右。試驗(yàn)過(guò)程中，于18:30測(cè)定1.0m水深處的水質(zhì)指標(biāo)為亞硝酸鹽低于0.05mg/L、氨態(tài)氮0.2mg/L、溶解氧6.5mg/L以上，pH 8.5。試驗(yàn)期間水溫變化范圍26.0~27.0℃。

　　為了保證消毒劑的藥物濃度在養(yǎng)殖水體中的準(zhǔn)確性，采用PVC板制作了12個(gè)規(guī)格一致的內(nèi)口徑邊長(zhǎng)60厘米的正方形、高度2.48米的圍隔（圖1）。

　　圍隔在使用前，將其放置在養(yǎng)殖池塘中浸泡了4天。正式試驗(yàn)時(shí)，將圍隔以站立的形式放置在養(yǎng)殖池塘中（圖2）。精確測(cè)定圍隔中的池水體積后，根據(jù)圍隔內(nèi)水體的體積計(jì)算出用藥量，定量使用幾種消毒劑。

　　用于本試驗(yàn)的2種來(lái)自不同公司生產(chǎn)的ClO2片劑，以編號(hào)Ⅰ、Ⅱ號(hào)片劑表示，另外2種ClO2粉劑，以編號(hào)Ⅰ、Ⅱ粉劑表示，共4種供試消毒劑藥物。

　　對(duì)ClO2片劑和ClO2粉劑，臨用前打開包裝袋，根據(jù)圍隔內(nèi)水體的體積計(jì)算用藥量。將編號(hào)為Ⅰ、Ⅱ號(hào)的2種ClO2片劑，分別將每種片劑直接拋灑在2個(gè)圍隔內(nèi)，而將在Ⅱ號(hào)ClO2片劑粉碎后，溶解在水中并活化15分鐘后，潑灑在2個(gè)圍隔中。將編號(hào)為Ⅰ和Ⅱ號(hào)ClO2粉劑用池塘水將藥物稀釋、活化15分鐘后，潑灑在圍隔內(nèi)水體中，使不同圍隔內(nèi)水體中的ClO2片劑或者粉劑的濃度，均分別達(dá)到0.90mg/L的濃度。

　　在圍隔中用藥結(jié)束后，分別在經(jīng)過(guò)1.5小時(shí)和3小時(shí)后，在圍隔內(nèi)利用采水器分別在離水面0.3米、1.0米和2.0米處采集水樣（圖3），同時(shí)在圍隔外的池塘中同樣水層采集水樣，作為為用消毒劑的對(duì)照組。

　　將采集的水樣盛裝在經(jīng)過(guò)高壓滅菌處理的玻璃試管內(nèi)，并置放與帶有冰塊的采樣箱內(nèi)帶回實(shí)驗(yàn)室，在30分鐘時(shí)間內(nèi)完成從采水樣到在培養(yǎng)基上接種細(xì)菌的過(guò)程。

　　采集的水樣帶回實(shí)驗(yàn)室后，在無(wú)菌條件下從每個(gè)水樣中吸取500.0μL，在滅菌后的試管中用滅菌生理鹽水進(jìn)行10倍、100倍、1000倍和10000倍的系列稀釋。分別從稀釋后的水樣中吸取50.0μL池塘水，接種在盛有BHIA培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，每個(gè)稀釋度的水樣接種3個(gè)培養(yǎng)皿。接菌后的培養(yǎng)皿放在28℃的恒溫培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)24小時(shí)后，通過(guò)計(jì)數(shù)培養(yǎng)皿中出現(xiàn)的菌落數(shù)，評(píng)價(jià)各種消毒劑在池塘水體中的殺菌效果（圖4）。

　　在圍隔中投放ClO2制劑消毒劑結(jié)束后的1.5小時(shí)，分別從用藥濃度為0.9mg/L的ClO2粉劑組、ClO2片劑組和對(duì)照組各圍隔水體中，用采水器采集池水，帶回實(shí)驗(yàn)室對(duì)養(yǎng)殖水體中細(xì)菌進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)養(yǎng)的結(jié)果如圖1所示。由圖1可以看出，當(dāng)ClO2制劑的用藥濃度為0.9mg/L的條件下，稀釋并活化15分鐘后潑灑在圍隔中的ClO2粉劑，在潑灑用藥1.5小時(shí)后，顯示出了對(duì)圍隔水體中細(xì)菌良好的殺菌效果；而直接拋灑在圍隔水體中的ClO2片劑，與未用藥物的對(duì)照組相比，未顯示出明顯的殺菌效果。

　　注：“A”代表未用消毒劑的對(duì)照組；“B”代表片劑用藥組；“C”代表ClO2粉劑用藥組；“Ⅰ”代表各組的第1個(gè)圍隔，“Ⅱ”代表各組的第2個(gè)圍隔；“Q”代表將水樣經(jīng)過(guò)了1000倍的稀釋；“W”代表將水樣經(jīng)過(guò)了10000倍的稀釋；“a”代表30厘米水深處采取的水樣，“b”代表100厘米水深處采取的水樣，“c”代表200厘米水深處采取的水樣。

　　在圍隔中投放幾種ClO2制劑結(jié)束3小時(shí)后，分別從各圍隔水體中，用采水器采集池水，帶回實(shí)驗(yàn)室對(duì)水體中細(xì)菌進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)的結(jié)果如圖2所示。由圖2可以看出，當(dāng)ClO2制劑的用藥濃度均為0.9mg/L的條件下，將ClO2粉劑稀釋并活化15分鐘后潑灑在圍隔中的2個(gè)試驗(yàn)組，以及將ClO2片劑粉碎后稀釋并活化15分鐘后潑灑在圍隔中的1個(gè)試驗(yàn)組，在潑灑用藥3小時(shí)后，均顯示出了對(duì)圍隔內(nèi)水體中細(xì)菌的良好的殺菌效果；而將ClO2片劑直接拋灑在圍隔水體中的試驗(yàn)組，與對(duì)照組相比，則未顯示出明顯的殺菌效果。

　　注：“A”代表未用消毒劑的對(duì)照組；“B”代表ClO2的Ⅰ號(hào)片劑直接拋灑用藥組；“C”代表將ClO2的Ⅱ號(hào)片劑經(jīng)粉碎稀釋在水體中并活化15分鐘后潑灑用藥組；“D”代表ClO2的Ⅰ號(hào)粉劑稀釋在水體中并活化15分鐘后潑灑用藥組；“E”代表ClO2的Ⅱ號(hào)粉劑稀釋在水體中并活化15分鐘后潑灑用藥組；“W”代表將水樣經(jīng)過(guò)了10000倍的稀釋；“a”代表在30厘米水深處采取的水樣，“b”代表100厘米水深處采取的水樣，“c”代表200厘米水深處采取的水樣。

　　在2004年11月左右，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部啟動(dòng)了所謂“獸藥地方標(biāo)準(zhǔn)升國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)”的工作，隨后農(nóng)業(yè)農(nóng)村部受理了一些漁藥企業(yè)提交的將ClO2制劑作為水產(chǎn)用獸藥地標(biāo)升國(guó)標(biāo)的申請(qǐng)，并且順利地通過(guò)了由中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所組織的相關(guān)專家評(píng)審，其評(píng)審結(jié)果發(fā)布在《獸藥地方標(biāo)準(zhǔn)升國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)目錄（7）》中。隨著這個(gè)結(jié)果的發(fā)布，也就是意味著ClO2制劑已經(jīng)被農(nóng)業(yè)農(nóng)村部認(rèn)定為我國(guó)水產(chǎn)用“國(guó)標(biāo)漁藥”了。

　　然而，由于當(dāng)時(shí)用于控制ClO2制劑質(zhì)量的“國(guó)家（試行）標(biāo)準(zhǔn)”，并不能做到真正有效地控制ClO2制劑的產(chǎn)品質(zhì)量，部分心術(shù)不正的人因此而制售了大量假冒偽劣的ClO2制劑。結(jié)果導(dǎo)致在我國(guó)漁藥市場(chǎng)上流通的ClO2制劑陷入了泥沙俱下、魚目混珠、極為混亂的局面！

　　正是由于ClO2制劑的產(chǎn)品“質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)”不能控制產(chǎn)品的質(zhì)量，在2012年4月17日農(nóng)業(yè)農(nóng)村部發(fā)布的1759號(hào)公告，也就是在公布第三批地標(biāo)升國(guó)標(biāo)《獸藥試行標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)正標(biāo)準(zhǔn)目錄（3）》中，ClO2制劑作為水產(chǎn)用“國(guó)標(biāo)漁藥”的“國(guó)家（試行）標(biāo)準(zhǔn)”被從目錄中清除了。在該公告中，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部對(duì)清除這個(gè)“國(guó)家（試行）標(biāo)準(zhǔn)”的原因說(shuō)明是，“不同企業(yè)該類產(chǎn)品的處方和劑型、活化所需酸的比例、反應(yīng)時(shí)間等均不一致，試行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中一步碘量法無(wú)法控制產(chǎn)品中二氧化氯的含量”。也就是從2012年后，部分漁藥制售企業(yè)開始將ClO2制劑作為水產(chǎn)用“調(diào)水改水”的“非藥品”進(jìn)行推廣了。在ClO2制劑的劑型方面，除了原來(lái)的水劑和粉劑之外，還推出了因?yàn)楸阌谑褂枚�深受廣大水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)者歡迎的ClO2的片劑。

　　無(wú)論是將ClO2制劑作為消毒劑使用的水產(chǎn)用“國(guó)標(biāo)漁藥”，還是將其作為“改水調(diào)水”的“非藥品”使用，其目的無(wú)一例外都是為了殺滅水體中的微生物。

　　水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)者將ClO2片劑直接拋灑在水產(chǎn)養(yǎng)殖水體中，雖然具有使用簡(jiǎn)便而且使用者不會(huì)受到氯氣味的刺激等優(yōu)點(diǎn)。但是，將其ClO2片劑直接拋灑在養(yǎng)殖水體中，是否具有與將ClO2粉劑用水稀釋并活化后潑灑在水體中的方法一樣的消毒效果？一直沒(méi)有見到相關(guān)的試驗(yàn)報(bào)告。本試驗(yàn)的結(jié)果證明了將ClO2片劑直接拋灑在養(yǎng)殖水體中的使用方法，沒(méi)有出現(xiàn)產(chǎn)品使用者期待的殺菌消毒效果。這也是我們要告誡廣大的水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)者需要充分注意的。

　　最后，還需要說(shuō)明的一個(gè)問(wèn)題是，因?yàn)槲覀冊(cè)谑褂眠@幾種ClO2制劑，尚沒(méi)有對(duì)其性狀進(jìn)行檢測(cè)，因此還難以判定這些供試產(chǎn)品的質(zhì)量?jī)?yōu)劣。不過(guò)，無(wú)論這些號(hào)稱ClO2片劑的質(zhì)量究竟如何，將其直接拋灑在養(yǎng)殖水體中，是不會(huì)獲得理想的消毒殺菌效果的。