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　　贏創德固賽（中國）投資有限公司動物營養業務線 肖緒誠 高俊

　　羅非魚自身不能合成其生長所需的10種必須氨基酸（EAA），必須通過攝取食物補充以滿足其生長發育的需要。目前，氨基酸的需要量研究通常選用劑量法來評估。但近年來，飼料營養素稀釋法和缺乏法也被接受并應用于營養素需要量的研究中。本文就羅非魚的必需氨基酸相關研究進行概述，以期對實際生產配方的制作起到指導作用。文中氨基酸需要量數據如無特別標注，數值均為總氨基酸需要量（%飼料）。

　　在羅非魚飼料中，蛋氨酸通常為第一限制性氨基酸，在以豆粕為主要蛋白源的飼料中蛋氨酸缺乏最為嚴重。羅非魚蛋氨酸需要量研究可以追溯到上世紀八十年代。Jackson和Capper（1982）研究發現，初始體重為1.7g的莫桑比克羅非魚幼魚（Sarotherodon mossambicus）的蛋氨酸需要量≤0.53%（含0.74%半胱氨酸），Santiago和Lovell（1988）報道，當飼料中半胱氨酸含量為0.15%時，尼羅羅非魚仔魚（62mg初始體重）的蛋氨酸需要量為0.75%。近年來，關于羅非魚幼魚總含硫氨基酸需要量（%飼料量）研究結果也有報道，例如：0.49%蛋氨酸（Nguyen和Davis，2009a）和0.85%總含硫氨基酸（Nguyen和Davis，2009b），0.91%蛋氨酸（0.10%半胱氨酸，干物質基礎）（He等，2017）和0.99%總含硫氨基酸（Diogenes等，2016）。但也有許多研究表明，羅非魚對蛋氨酸的需要量可能更高。例如：Xiang等（2014）報道68g尼羅羅非魚飼料中總含硫氨基酸為1.43-1.46%（干物質基礎）。贏創-塔克辛大學聯合實驗的結果表明，飼喂含1.25-1.57%總含硫氨基酸飼料的雜交羅非魚（O.nilotics×O.mossambicus）體增重和體蛋白沉積最高（Figueiredo-Silva等，2015）。He等（2017b）也研究發現，飼喂0.99%蛋氨酸（含0.47%半胱氨酸）飼料的尼羅羅非魚生長最好。

　　以上研究結果都是由劑量法獲得的。Liebert（2009）選用飼料稀釋法確定羅非魚的蛋氨酸需要量，其研究表明，飼喂0.73%和0.94%蛋氨酸飼料的羅非魚幼魚可達到70%和80%理論最大氮沉積率。同時，為了達到上述實驗預期，其飼料賴氨酸含量至少為2%（Xiang等，2014；Figueiredo-Silva等，2015；He等，2017a；He等，2017b）。然而也有研究指出，僅含1.50-1.67%的賴氨酸飼料即可滿足上述研究中羅非魚幼魚的生長需要。但近年來的許多研究發現，飼料中1.50-1.67%的賴氨酸并不能滿足羅非魚幼魚的生長所需（例如：2.32%，Takishata等，2009；≥1.8%，Bomfim等，2010），同時還會低估蛋氨酸的實際需要量。He等（2017b）研究發現，羅非魚飼料中的能量含量不足也會低估其必需氨基酸的需要量。其結果表明，當飼料中的能值從10.9MJ/kg升高至12.4MJ/kg時，尼羅羅非魚的蛋氨酸需要量（半胱氨酸0.47%）會從0.73%升高至0.99%。

　　近年來許多研究結果明確指出，在評估營養元素的需要量實驗中，其實驗飼料的必需營養素（包括氨基酸）是否平衡及飼料的能量水平都會直接影響最后的實驗結果。綜上，在滿足賴氨酸需要量（2%）時，羅非魚早期生長階段的總含硫氨基酸需要量為1.4-1.6%。

　　在關于羅非魚必需氨基酸的研究中，賴氨酸的研究最為廣泛。早在1982年，Jackson和Capper就發表過關于羅非魚賴氨酸需要量的研究報告。該研究表明，莫桑比克羅非魚幼魚的最適飼料賴氨酸含量為1.62%。Santiago和Lovell（1988）報道的尼羅羅非魚仔魚（41mg初始體重）最適飼料賴氨酸含量為1.43%。Takishita等（2009）研究發現，飼喂含賴氨酸2.32%飼料（可消化賴氨酸含量為2.17%）的羅非魚幼魚（0.98g初始體重）增重率最高。然而，該研究的結果顯著高于以往的研究數據。在之后的研究中發現，羅非魚幼魚（1.12g初始體重）（Bomfim等，2010）的體增重隨飼料賴氨酸含量（1.05-1.80%）的升高而成線性增加關系，最適飼料賴氨酸含量最少為1.80%（可消化賴氨酸含量至少為1.7%）。但Furuya等（2012）使用二次回歸方程計算得出，羅非魚幼魚（1.44g初始體重）最適飼料可消化賴氨酸含量僅為1.56%即可達到其最佳增重率。然而在該研究中，羅非魚的特定生長率（SGR）僅為0.10g/天，顯著低于其他研究報道中魚體的特定生長率（0.38和0.47g/天）（Takishita等，2009；Bomfim等，2010），盡管這三個研究均選用初始體重相似的羅非魚幼魚（1g左右）作為研究對象。

　　以上研究結果都是由劑量法獲得的，而Liebert（2009）和Diogenes等（2016）選用其它方法評估羅非魚賴氨酸的飼料需要量。Liebert（2009）研究發現，評估尼羅羅非魚幼魚（12g初始體重）的賴氨酸需要量受很多因素的影響（魚體的生長潛力，氨基酸的利用率和攝食率等）。研究者發現，在該實驗條件的魚體利用率下，飼喂含賴氨酸1.63%和2.09%飼料的羅非魚即可達到70%和80%理論最大氮沉積率。Diogenes等（2016）采用營養物質缺乏法研究表明，尼羅羅非魚幼魚（20g初始體重）的賴氨酸需要量僅為1.56%。由于該研究的實驗配方中其它必需氨基酸含量均低于羅非魚的最適需要量，因此羅非魚的實際賴氨酸需要量可能被低估了。關于羅非魚成魚賴氨酸需要量的研究鮮有報道。Michelato等（2016a）指出尼羅羅非魚（275g）最適飼料賴氨酸含量為1.46%。

　　綜上，盡管前文所述研究結果存在差異，但所報道的最適飼料賴氨酸含量（1.56-2.32%）均高于Santiago和Lovell（1988）報道的最適羅非魚仔魚飼料賴氨酸含量（1.43%）。這種差異可能是由于近年來研究的羅非魚多為改良品系和全雄品系，這些品系相對于傳統品系具有較高的生長速度。

　　除蛋氨酸和賴氨酸之外，魚類蘇氨酸的研究也有大量研究報道。蘇氨酸是機體蛋白質合成所需的必需氨基酸，它也在其它許多生理功能中起著重要作用，例如魚體粘蛋白的合成和免疫反應。因此在商品飼料中，蘇氨酸含量可以適當高于魚體的實際需要量，特別是當養殖環境較差，魚體遭受免疫沖擊的時候。

　　Santiago和Lovell（1988）最先報道羅非魚蘇氨酸的需要量，該研究發現，尼羅羅非魚幼魚（初始體重小于1g）的飼料最適蘇氨酸含量為1.05%。Liebert和Benkendorff（2007）和Liebert（2009）用飼料稀釋法評估50g尼羅羅非魚幼魚的蘇氨酸需要量發現，飼喂含有0.83%和1.05%的蘇氨酸飼料的尼羅羅非魚即可分別達到70%和80%的最大氮沉積率。而近年的研究表明，羅非魚的蘇氨酸需要量可能更高，例如羅非魚幼魚為1.33%（Yue等，2014）和1.45%（Diogenes等，2016），羅非魚成魚為1.62-1.72%（Zhou等，2014）和1.15-1.20%（Michelato等，2016b）。

　　在羅非魚中，除蛋氨酸、賴氨酸和蘇氨酸之外，其他必需氨基酸研究較少。表1總結了目前羅非魚必需氨基酸相關研究的已發表數據。

　　對現有已發表的研究數據綜合分析發現：（1）相似體重（生長階段）羅非魚必需氨基酸需要量研究結果差異較大。這些差異可能由于實驗魚類因素（品系或年齡不同）、實驗設計因素（評估方法和實驗條件）、飼料因素（消化率，實驗氨基酸的消化率，其他營養素平衡與否及飼料的質量）和實驗選取的統計方法等因素之間的差異所導致；（2）近年來關于羅非魚常見幾種必需氨基酸的研究結果（Liebert，2009；Xiang等，2014；Figueiredo-Silva等，2015及He等，2017b關于總含硫氨基酸；Takishita等，2009和Bomfim等，2010關于賴氨酸的研究）均高于早年的研究報道結果。這可能是因為以往的實驗中除待評估的氨基酸外，飼料中其它氨基酸含量未達到魚體的需要量而導致該實驗低估了待評價氨基酸的需要量；（3）關于羅非魚可消化氨基酸需要量報道較少，大多數研究結果僅為總氨基酸需要量。在飼料配方設計中如果不考慮魚類可消化水平的氨基酸需要量，僅參照魚類對氨基酸的總體需要量來設計，這可能會導致魚類對制配的飼料實際消化利用率較低，進而引起魚體生長緩慢；（4）現有關于羅非魚必需氨基酸的需要量研究多在其幼體階段進行，但實際養殖過程中魚類經過數月達到上市規格（700-1000克）。關于羅非魚成魚階段的必需氨基酸需要量研究結果較缺乏，無法滿足實際生產的需求；（5）目前廣泛養殖的羅非魚品系（如吉富品系）多為遺傳性狀改良后的羅非魚，其生長速度較傳統羅非魚品系較快，具有較高的必需氨基酸需要量。

　　由于現有研究結果的缺乏，探討不同生長階段和不同養殖模式下羅非魚對必需氨基酸的需要量顯得尤為重要。